ডায়নামিক বায়োসেনসর ওয়াই-স্ট্রাকচার অ্যামাইন কাপলিং কিট ১

মূল বৈশিষ্ট্য

• নতুন Y-কাঠামো লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 - রেডের সাথে প্রাথমিক অ্যামাইনের (যেমন NH2-টার্মিনাস, লাইসিন) সাথে জৈব অণু সংযোগের অনুমতি দেয়।
• সুবিধাজনক স্ট্যান্ডার্ড কেমিস্ট্রি (NHS কেমিস্ট্রি)।
• HeliX® অ্যাডাপ্টার চিপের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।
• বিশুদ্ধ লিগ্যান্ড-ডিএনএ কনজুগেট (> 5 kDa) এর জন্য proFIRE® পরিশোধনের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।
• একাধিক লিগ্যান্ডের কাপলিং একই সাথে সঞ্চালিত হতে পারে।
• ফলন> 95% বিশুদ্ধ লিগ্যান্ড-ডিএনএ চূড়ান্ত পণ্যের ব্যবহারকারীর নির্ধারিত গুণমানের সাথে সংযুক্ত।
• তিনটি পৃথক সংযোজন বিক্রিয়ার জন্য বিকারক অন্তর্ভুক্ত (প্রতিটি প্রায় ১০-৫০টি পুনর্জন্ম; সর্বোচ্চ ৫০০ পর্যন্ত)।
• স্বয়ংক্রিয় স্ট্যান্ডার্ড পুনর্জন্ম প্রক্রিয়ার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।

কর্মপ্রবাহ ওভারview

3-পদক্ষেপ সংযোগ কর্মপ্রবাহ

সময়রেখা: সময়মতো < 1 ঘন্টা | ইনকিউবেশন ~ 2 ঘন্টা | মোট ~ 3 ঘন্টা

পণ্য বিবরণ

অর্ডার নম্বর: HK-NYS-NHS-1
সারণী 1. বিষয়বস্তু এবং স্টোরেজ তথ্য

উপাদান	ক্যাপ	পরিমাণ	স্টোরেজ
Y-গঠন লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 এনএইচএস	নীল	3 এক্স	-20°C
বাফার এ [1]	স্বচ্ছ	1 x 1.8 মিলি	-20°C
বাফার সি [2]	স্বচ্ছ	3 x 1.8 মিলি	-20°C
বাফার PE40 [3]	স্বচ্ছ	3 x 1.5 মিলি	-20°C
ডিডিএইচ2O	স্বচ্ছ	1.5 মিলি	-20°C
ক্রসলিংকার	বাদামী	3 এক্স	-20°C
পরিশোধন স্পিন কলাম	লাল	6 এক্স	2-8° সে
পরিশোধন স্পিন কলামের জন্য 2.0 mL প্রতিক্রিয়া টিউব		6 এক্স	RT
কেন্দ্রাতিগ ফিল্টার ইউনিট (3 kDa MWCO)[4]		3 এক্স	RT
সেন্ট্রিফিউগেশন সংগ্রহ নল		3 এক্স	RT

শুধুমাত্র গবেষণা ব্যবহারের জন্য।
এই পণ্যের একটি সীমিত শেলফ জীবন আছে, লেবেলে মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ দেখুন।

গুরুত্বপূর্ণ
পণ্যগুলি বিভিন্ন তাপমাত্রায় পাঠানো হতে পারে, তবে স্টোরেজটি টেবিলে বর্ণিত নির্দেশিকা মেনে চলা উচিত।
এই কিটটিতে প্রায় ৫০-২০০ µg জৈব অণুর পাঁচটি সংযোজনের জন্য যথেষ্ট পরিমাণে বিকারক রয়েছে।
পরিশোধন স্পিন কলামের রজন স্লারিতে 0.02% সোডিয়াম অ্যাজাইড থাকে।

অতিরিক্ত উপকরণ প্রয়োজন

সারণি 2. অতিরিক্ত উপকরণ

উপাদান	মন্তব্য
বেঞ্চটপ মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ	1,000 xg থেকে 13,000 xg এর মধ্যে প্রয়োজনীয় গতি পরিসীমা
ঘূর্ণি
1.5 মিলি প্রতিক্রিয়া টিউব
UV-ভিস স্পেকট্রোফটোমিটার (যেমন ন্যানোড্রপ)	নির্ধারণের জন্য লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 কনজুগেট এর ঘনত্ব

সমস্ত প্রয়োজনীয় সমাধান এবং বাফার কিট অন্তর্ভুক্ত করা হয়.

গুরুত্বপূর্ণ সাধারণ নোট

• ক লাইওফিলাইজড লিগান্ড স্ট্র্যান্ড টিউবের নীচে সবসময় পাওয়া যায় না; এটি টিউব প্রাচীর বা টিউব ক্যাপ মধ্যে থাকতে পারে. অনুগ্রহ করে সর্বদা লাইওফিলাইজড লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ডের উপস্থিতি পরীক্ষা করুন, এটির স্পষ্ট ছোলার উপস্থিতি দ্বারা সনাক্ত করা যায় (এটি দেখতে আপনাকে টিউব লেবেলটি সরাতে হতে পারে)। যদি এটি নীচে না থাকে, দয়া করে বাফারে ডিএনএ দ্রবীভূত করার আগে কয়েক মিনিটের জন্য উচ্চ গতিতে টিউবটিকে সেন্ট্রিফিউজ করুন। বিকল্পভাবে, আপনার পিপেটের ডগাটি ডিএনএ পেলেটের কাছে রাখুন এবং সরাসরি এটির উপর বাফারটি ছড়িয়ে দিন; ডিএনএ দ্রুত দ্রবীভূত হবে।
• খ. ক্রসলিংকারটি লিগ্যান্ডের প্রাথমিক অ্যামাইন গ্রুপ (-NH2) এর সাথে সংযুক্ত থাকবে। প্রতিটি পলিপেপটাইড শৃঙ্খলের N-টার্মিনাসে এবং লাইসিন অ্যামিনো অ্যাসিড অবশিষ্টাংশের পার্শ্ব-শৃঙ্খলে প্রাথমিক অ্যামাইন বিদ্যমান থাকে।
• গ. সংযোগ প্রক্রিয়া চলাকালীন প্রাথমিক অ্যামাইন (যেমন ট্রিস, গ্লাইসিন) ধারণকারী কোনো বাফার ব্যবহার করা এড়িয়ে চলুন (অনুগ্রহ করে সামঞ্জস্য পত্রক বিভাগটি পরীক্ষা করুন)।
• d সংযোজন প্রক্রিয়া চলাকালীন 1 মিমি পর্যন্ত ডিথিওথ্রিটল (ডিটিটি) ব্যবহার করা যেতে পারে। সংযোজন প্রক্রিয়া চলাকালীন 2-Mercaptoethanol বা অন্য কোনো থিওল-ভিত্তিক হ্রাসকারী এজেন্ট ব্যবহার করা এড়িয়ে চলুন। যদি একটি হ্রাসকারী এজেন্ট প্রয়োজন হয়, TCEP 1 মিমি পর্যন্ত সুপারিশ করা হয়।
• e আংশিক বিশুদ্ধ প্রোটিন ব্যবহার এড়িয়ে চলুনamples বা প্রোটিন sampবাহক ধারণকারী লেস (যেমন BSA)।
• চ সর্বোচ্চ বিক্রিয়া ফলন নিশ্চিত করতে, লিগ্যান্ডকে বাফার সি-তে দ্রবীভূত করা উচিত। সংযোজন প্রক্রিয়ার আগে বাফার বিনিময়ের সুপারিশ করা হয়।
• g শুরু করার আগে, সংক্ষিপ্তভাবে সমস্ত টিউবকে নীল, বাদামী এবং স্বচ্ছ ক্যাপ দিয়ে সেন্ট্রিফিউজ করুন যাতে নিশ্চিত করা যায় যে সমস্ত উপাদান টিউবের নীচে রয়েছে।
• জ. ৫ kDa এর কাছাকাছি বা তার কম আণবিক ওজনের অণুগুলির জন্য, পরিশোধন প্রক্রিয়ার সময় অতিরিক্ত সতর্কতা অবলম্বন করা প্রয়োজন। প্রদত্ত ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম ব্যবহার করে ছোট অণু এবং কিছু পেপটাইড সঠিকভাবে পরিশোধিত নাও হতে পারে। আরও তথ্যের জন্য দয়া করে support.dbs@bruker.com এ ইমেল করুন।
• i যদি প্রোটিনের পিআই <6 হয়, তাহলে সংমিশ্রণের জন্য একটি কম পিএইচ কিট (অর্ডার নং: HK-NHS-3) সুপারিশ করা হয়। আরও তথ্যের জন্য, ইমেল করুন support.dbs@bruker.com সম্পর্কে.

লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ডের সাথে জৈব অণুর ৩-পদক্ষেপ সংযোজন ১

অনুগ্রহ করে শুরু করার আগে সম্পূর্ণ প্রোটোকল পড়ুন এবং বাধা ছাড়াই সমস্ত পদক্ষেপগুলি সম্পাদন করুন৷

টিপ

এই প্রোটোকল একাধিক কাপলিং প্রতিক্রিয়া জন্য একযোগে সঞ্চালিত করা যেতে পারে.
আংশিক বিশুদ্ধ প্রোটিন ব্যবহার এড়িয়ে চলুনamples বা প্রোটিন sampবাহক ধারণকারী লেস (যেমন, BSA)।
শুরু করার আগে ক্রসলিংকারকে ব্যবহারের আগে ঘরের তাপমাত্রায় পৌঁছানোর অনুমতি দিন।
এখন থেকে, Y-স্ট্রাকচার লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 NHS কে লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 বলা হবে।

ন্যানোলিভার পরিবর্তন

1. ব্যবহারের আগে লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ কে ৪০ µL বাফার A তে দ্রবীভূত করুন, ঘূর্ণি ঘুরান যতক্ষণ না সমস্ত কঠিন পদার্থ সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হয় এবং কিছুক্ষণের জন্য ঘোরে।
2. ১০০ µL ddH2O যোগ করে ক্রসলিংকার (বাদামী টুপি) দ্রবীভূত করুন, ঘূর্ণি যতক্ষণ না সমস্ত কঠিন পদার্থ সম্পূর্ণরূপে দ্রবীভূত হয় এবং অল্প সময়ের জন্য ঘোরে। গুরুত্বপূর্ণ: সর্বদা তাজা যৌগ ব্যবহার করুন।
3. একটি লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ অ্যালিকোটে ১০ µL সদ্য প্রস্তুত লিঙ্কার দ্রবণ যোগ করুন। ধাপ ২ থেকে অবশিষ্ট লিঙ্কার দ্রবণটি ফেলে দিন।
4. 10 সেকেন্ডের জন্য বিক্রিয়াকে ঘূর্ণি করুন, নিচের দিকে ঘুরুন এবং ঘরের তাপমাত্রায় 20 মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।
   গুরুত্বপূর্ণ ইনকিউবেশন সময় অতিক্রম করবেন না বা প্রতিক্রিয়া ফলন হ্রাস পাবে।
5. ইতিমধ্যে, একটি কাপলিং প্রতিক্রিয়ার জন্য দুটি পরিশোধন স্পিন কলাম (লাল ক্যাপ) সামঞ্জস্য করুন:
   • ক কলামের নীচের সীলটি সরান এবং ক্যাপটি আলগা করুন (ক্যাপটি সরান না)।
   • খ. একটি 2.0 মিলি প্রতিক্রিয়া টিউবে কলামটি রাখুন।
   • গ. স্টোরেজ দ্রবণ অপসারণের জন্য ১,৫০০ xg শক্তিতে ১ মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ।
   • d. কলামের রজন স্তরে 400 µL বাফার C যোগ করুন। বাফার অপসারণের জন্য 1,500 xg এ 1 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন।
   • e ধাপ d পুনরাবৃত্তি করুন এবং প্রতিক্রিয়া টিউব থেকে ফলস্বরূপ বাফার বাতিল করুন। পরিশোধন স্পিন কলাম এখন শুষ্ক অবস্থায় থাকা উচিত।
6. Sample লোড হচ্ছে
   • ক ধাপ 5 থেকে কলামগুলিকে নতুন 1.5 মিলি প্রতিক্রিয়া টিউবে রাখুন।
   • খ. স্পিন কলাম নম্বর 1 এর ক্যাপটি সরান এবং s প্রয়োগ করুনample ধাপ 4 থেকে রজন বিছানা শীর্ষে.
   • গ. 1,500 xg এ সেন্ট্রিফিউজ 2 মিনিটের জন্য s সংগ্রহ করতেample (প্রবাহের মাধ্যমে) ব্যবহারের পরে পরিশোধন স্পিন কলাম বাতিল করুন।
   • d স্পিন কলাম নম্বর 2 এর ক্যাপটি সরান এবং s প্রয়োগ করুনample ধাপ গ থেকে রজন বিছানায়।
   • ঙ। 1,500 xg এ সেন্ট্রিফিউজ 2 মিনিটের জন্য s সংগ্রহ করতেample (প্রবাহের মাধ্যমে) ব্যবহারের পরে পরিশোধন স্পিন কলাম বাতিল করুন।

লিগ্যান্ড কনজুগেশন

1. s-তে প্রায় 100 µg (সর্বোচ্চ 200 µg পর্যন্ত) লিগ্যান্ড (ঘনত্ব প্রায় 0.5 – 50 mg/mL) যোগ করুন।ampধাপ 6 থেকে le. সর্বোত্তম অবস্থার জন্য প্রায় একটি ভলিউম ব্যবহার করুন. 50 μL
   EXAMPLE: প্রোটিনের ঘনত্বকে 2 mg/mL এ সামঞ্জস্য করুন এবং সংযোজনের জন্য 50 μL ব্যবহার করুন।
   গুরুত্বপূর্ণ নিশ্চিত করুন যে লিগ্যান্ডের স্টোরেজ বাফারে কোনো প্রাথমিক অ্যামাইন নেই, যেমন ট্রিস বাফার, গ্লাইসিন (অনুগ্রহ করে গুরুত্বপূর্ণ নোট চেক করুন)।
2. উপরে এবং নীচে পাইপ করে প্রতিক্রিয়া মিশ্রিত করুন এবং এটিকে কমপক্ষে 1 ঘন্টা ঘরের তাপমাত্রায় প্রতিক্রিয়া করতে দিন।
   গুরুত্বপূর্ণ ঘূর্ণি করবেন না। প্রয়োজনে, বিক্রিয়াটি 4 °C তাপমাত্রায় একটি দীর্ঘ প্রতিক্রিয়া সময় (যেমন রাতারাতি) সহ করা যেতে পারে।

proFIRE® পরিশোধন

1. উপযুক্ত proFIRE® ওয়ার্কফ্লো ব্যবহার করে একটি পরিশোধন করুন (অনুগ্রহ করে proFIRE® ব্যবহারকারীর ম্যানুয়াল পড়ুন)। দয়া করে নিশ্চিত করুন যে এসample আয়তন হল 160 μL।
   1. ক ভলিউম 160 μL এর কম হলে, বাফার A দিয়ে অনুপস্থিত ভলিউমটি পূরণ করুন।
      খ. ভলিউম 160 µL অতিক্রম করলে, অনুগ্রহ করে অতিরিক্ত 160 µL রান সঞ্চালন করুনample গ্রাস করা হয়।
   2. ডেটা ব্যবহার করুন Viewকোন ভগ্নাংশে বিশুদ্ধ কনজুগেট আছে তা সনাক্ত করার জন্য proFIRE® এর একটি সফ্টওয়্যার।
      একজন প্রাক্তনample ক্রোমাটোগ্রামটি অতিরিক্ত তথ্য বিভাগে দেখানো হয়েছে: proFIRE® লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 কনজুগেটের পরিশোধন।
   3. ভগ্নাংশ সংগ্রাহক থেকে প্রস্তাবিত ভগ্নাংশগুলি সরান।

টিপ

প্রোফায়ার® চলমান বাফারে লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ কনজুগেট দীর্ঘক্ষণ রাখবেন না। বাফার এক্সচেঞ্জের সাথে সাথে এগিয়ে যান।

বাফার এক্সচেঞ্জ

1. লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ কনজুগেট ধারণকারী প্রথম proFIRE® ভগ্নাংশের ৫০০ µL সেন্ট্রিফিউগাল ফিল্টার ইউনিটে যোগ করুন। ১৩,০০০ xg (১৪,০০০ xg পর্যন্ত) তাপমাত্রায় ১০ মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং ফ্লো-থ্রু ফেলে দিন।
2. একই ফিল্টার ইউনিটে অবশিষ্ট ভগ্নাংশ যোগ করুন এবং সমস্ত গুলি সংগ্রহ করার জন্য সেন্ট্রিফিউগেশন ধাপটি পুনরাবৃত্তি করুনampএকটি নল মধ্যে les. (অতিরিক্ত তথ্য অনুগ্রহ করে চেক করুন: সেন্ট্রিফিউগাল ফিল্টার ইউনিটের সাথে বাফার এক্সচেঞ্জ এবং ঘনত্ব)।
3. ৩৫০ µL PE40 (অথবা TE40, HE40) বাফার যোগ করুন এবং ১০ মিনিটের জন্য ১৩,০০০ xg এ সেন্ট্রিফিউজ করুন। ফ্লো-থ্রু বাতিল করুন।
   গুরুত্বপূর্ণ PE40 (বা TE40, HE40) এ প্রোটিন স্থিতিশীল না হলে, অনুগ্রহ করে switchSENSE® সামঞ্জস্য পত্রের সাথে বাফার সামঞ্জস্যতা পরীক্ষা করুন।
4. ৩৫০ µL PE40 (অথবা TE40, HE40) বাফার যোগ করুন এবং ১০ মিনিটের জন্য ১৩,০০০ xg এ সেন্ট্রিফিউজ করুন। ফ্লো-থ্রু বাতিল করুন।
5. লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ কনজুগেট পুনরুদ্ধার করতে, সেন্ট্রিফিউগাল ফিল্টার ইউনিটটি উল্টে একটি নতুন সেন্ট্রিফিউগাল কালেকশন টিউবে (কিটে দেওয়া আছে) রাখুন।
   s স্থানান্তর করতে 1,000 মিনিটের জন্য 2 xg গতিতে ঘুরান।ampনল থেকে.

Aliquots এবং স্টোরেজ

1. 260 nm এ লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 কনজুগেটের শোষণ পরিমাপ করুন একটি UV-ভিস স্পেকট্রোফটোমিটারে (যেমন ন্যানোড্রপ)।
2. লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ কনজুগেট (c1) এর ঘনত্ব সন্নিবেশ করে নির্ধারণ করুন নিম্নলিখিত সমীকরণে:যেখানে d হল পথের দৈর্ঘ্য (সাধারণত 1 সেমি সমান; তবে, অনুগ্রহ করে UV-Vis স্পেকট্রোফটোমিটার ব্যবহারকারী ম্যানুয়ালটি দেখুন) এবং  হল 260 nm-এ DNA-এর বিলুপ্তি সহগ, যা 272,000 এর সমান।
3. বায়োচিপ কার্যকরীকরণের জন্য ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত দ্রবণের জন্য, অনুগ্রহ করে PE500 (অথবা TE1, HE40) বাফার (প্রয়োজনে 40% পর্যন্ত গ্লিসারল সহ) দিয়ে ঘনত্ব 40 nM (অথবা 10 µM পর্যন্ত) এ সামঞ্জস্য করুন এবং 20 µL অ্যালিকোট প্রস্তুত করুন।
4. ইচ্ছামত -৮৬ ডিগ্রি সেলসিয়াস এবং ৮ ডিগ্রি সেলসিয়াসের মধ্যে সংরক্ষণ করুন।
   দ্রবণের স্থায়িত্ব লিগ্যান্ড অণুর স্থায়িত্বের সাথে সম্পর্কিত।
   গুরুত্বপূর্ণ একটি switchSENSE® মিথস্ক্রিয়া পরিমাপের আগে, অনুগ্রহ করে কনজুগেট দ্রবণে উপযুক্ত অ্যাডাপ্টার স্ট্র্যান্ড যোগ করুন।

অতিরিক্ত তথ্য

লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ কনজুগেটের proFIRE® পরিশোধন

1. একটি পরিমাপ থেকে সর্বোত্তম ফলাফল নিশ্চিত করতে, চিপে কোন বিনামূল্যের লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 উপস্থিত থাকা উচিত নয়। অতএব, অশোধিত লিগান্ড স্ট্র্যান্ড 1 কনজুগেটগুলি পরিমাপের আগে আয়ন বিনিময় ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা বিশুদ্ধ করা আবশ্যক। এই মান নিয়ন্ত্রণ পদক্ষেপ আপনাকে আপনার সম্পর্কে অতিরিক্ত দরকারী তথ্য দেয়ampবিশুদ্ধতা
2. আমরা আয়ন বিনিময় কলাম, বাফার A [1] এবং বাফার B [5] দিয়ে সজ্জিত proFIRE® সিস্টেম ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি, যার গঠন একই, কিন্তু লবণের ঘনত্ব ভিন্ন, যা সর্বোচ্চ বিচ্ছেদের অনুমতি দেয়।
   গুরুত্বপূর্ণ Y-স্ট্রাকচার লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ – NHS কিটের জন্য, পরিশোধন প্রোগ্রাম শুরু করার সময় অনুগ্রহ করে DNA দৈর্ঘ্য (টাইপ ১) হিসেবে ২৪ লিখুন।
   চিত্র ১-এ লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড ১ কনজুগেট পরিশোধনের একটি সাধারণ প্রোফায়ার® ক্রোমাটোগ্রাম চিত্রিত করা হয়েছে, যেখানে প্রোটিন-ডিএনএ কনজুগেটের শীর্ষটি মুক্ত প্রোটিন (বামে) এবং মুক্ত ডিএনএ (ডানে) থেকে পৃথক করা হয়েছে।
   গুরুত্বপূর্ণ: প্রোফায়ার® সিস্টেমে ডিএনএ কনজুগেটগুলির স্বয়ংক্রিয় স্বীকৃতি এবং পরিমাণ নির্ধারণের জন্য একটি উপযুক্ত সফ্টওয়্যার রয়েছে।
3. বিশুদ্ধকরণের পর, লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড 1 কনজুগেট ভগ্নাংশ সংগ্রহ করুন (চিত্র 1: ভগ্নাংশ 8-10), কনজুগেটকে ঘনীভূত করুন এবং সেন্ট্রিফিউগাল ফিল্টার ইউনিট ব্যবহার করে আপনার পছন্দের বাফারের সাথে বাফার বিনিময় করুন, যেমনটি বিভাগ II এ বর্ণিত হয়েছে।চিত্র ১. লিগ্যান্ড স্ট্র্যান্ড কনজুগেট পরিশোধনের প্রোফায়ার® ক্রোমাটোগ্রাম। ব্যবহৃত বাফার: বাফার এ [1]; বাফার বি [5]।
   কলাম: proFIRE® কলাম। প্রবাহ: ১ মিলি/মিনিট। ব্যবহৃত প্রোগ্রাম: DNA দৈর্ঘ্য ২৪, টাইপ ১।

সেন্ট্রিফিউগাল ফিল্টার ইউনিটের সাথে বাফার এক্সচেঞ্জ এবং ঘনত্ব

1. একটি কেন্দ্রাতিগ ফিল্টার ইউনিট নিন, ফিল্টার ডিভাইসে উপযুক্ত আয়তন (500 µL) বাফার যোগ করুন এবং এটি ক্যাপ করুন।
2. ক্যাপড ফিল্টার ডিভাইসটি সেন্ট্রিফিউজ রটারে রাখুন, রটারের কেন্দ্রের দিকে ক্যাপ স্ট্র্যাপ সারিবদ্ধ করুন; অনুরূপ ডিভাইসের সাথে ভারসাম্যহীনতা।
3. প্রদত্ত সময়ের জন্য ডিভাইসটিকে 13,000 xg (বা 14,000 xg) এ স্পিন করুন।
4. প্রবাহটি সরান এবং ৩৫০ µL আয়তনের সাথে ১-৩ ধাপ পুনরাবৃত্তি করুন।
5. সেন্ট্রিফিউজ থেকে একত্রিত ডিভাইসটি সরান এবং মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ টিউব থেকে ফিল্টার ডিভাইসটি আলাদা করুন।
6. কনজুগেট পুনরুদ্ধার করতে, ফিল্টার ডিভাইসটিকে একটি পরিষ্কার সেন্ট্রিফিউগাল টিউবে উল্টে রাখুন, রটারের কেন্দ্রের দিকে খোলা ক্যাপটি সারিবদ্ধ করুন; অনুরূপ ডিভাইসের সাথে ভারসাম্যহীনতা। s স্থানান্তর করতে 2 xg এ 1,000 মিনিটের জন্য স্পিন করুনample ডিভাইস থেকে টিউব থেকে.

সামঞ্জস্য পত্রক

বাফার additives
সমস্ত উপলব্ধ কাপলিং কিটগুলির সাথে লিগ্যান্ডগুলির সংমিশ্রণ অনেকগুলি বিভিন্ন সংযোজন দিয়ে সঞ্চালিত হতে পারে। নিম্নলিখিত তালিকায় সমস্ত পরীক্ষা করা হয়েছে, কিন্তু দয়া করে মনে রাখবেন যে এখানে তালিকাভুক্ত নয় এমন অন্যরাও সফলভাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

* থিওল-ভিত্তিক হ্রাসকারী এজেন্ট
** প্রাথমিক অ্যামাইন রয়েছে
*** সাবধান, লিগ্যান্ডের ক্ষতি করতে পারে

pH/pI

লিগ্যান্ডের বৈশিষ্ট্যের উপর নির্ভর করে কনজুগেশন বাফারের pH মান pH 5.0 থেকে pH 8.0 পর্যন্ত হতে পারে। <6 এর পিআই সহ প্রোটিনের সংমিশ্রণ সম্পাদন করার সময়, অনুগ্রহ করে মনে রাখবেন যে কম পিএইচ সহ একটি বাফার ব্যবহার করলে কনজুগেটের আরও ভাল ফলন হতে পারে।

বাফার	pH	অর্ডার নং	রচনা
ফসফেট-সিট্রেট বাফার	pH 5	–	50 মিমি বাফার লবণ, 150 মিমি NaCl
বাফার এম	pH 6.5	BU-M-150-1	50 mM MES, 150 mM NaCl
বাফার এ	pH 7.2	BU-P-150-10	50 মিমি Na2এইচপিও4/NaH2PO4, 150 মিমি NaCl
বাফার সি	pH 8.0	BU-C-150-1	50 মিমি Na2এইচপিও4/NaH2PO4, 150 মিমি NaCl

লবণের ঘনত্ব
স্ট্যান্ডার্ড কনজুগেশনের জন্য, 50 mM বাফার লবণ এবং 150 mM NaCl (একবৈধ লবণ) ব্যবহার করা হয়।
প্রবল চার্জযুক্ত লিগ্যান্ডের সংযোজন করার সময়, নিশ্চিত করুন যে NaCl এর ঘনত্ব যথেষ্ট বেশি (400 mM পর্যন্ত NaCl সুপারিশ করা হয়)। অন্যথায়, DNA এর অবক্ষয় ঘটতে পারে।
মনোভ্যালেন্ট সোডিয়াম ক্যাটেশনের শিল্ডিং প্রভাব চিনির ফসফেট ব্যাকবোনটির ঋণাত্মক চার্জের নিরপেক্ষকরণের মাধ্যমে ডিএনএ স্থিতিশীলতার দিকে পরিচালিত করে।

দরকারী অর্ডার নম্বর

সারণি 3. অর্ডার নম্বর

পণ্যের নাম	পরিমাণ	অর্ডার নং
Y-স্ট্রাকচার অ্যামাইন কাপলিং কিট 2 – সবুজ	3 conjugations	HK-NYS-NHS-2
কেন্দ্রাতিগ ফিল্টার ইউনিট (10 kDa MWCO)	এক্সএনএমএক্সএক্স পিসি।	CF-010-5
10x বাফার A [1]	50 মিলি (ফলন 500 মিলি)	BU-P-150-10
5x বাফার বি [5]	50 মিলি (ফলন 250 মিলি)	BU-P-1000-5
১x বাফার সি [2]	12 মিলি	BU-C-150-1

যোগাযোগ

ডায়নামিক বায়োসেন্সর জিএমবিএইচ
Perchtinger Str. 8/10 81379 মিউনিখ জার্মানি

ব্রুকার সায়েন্টিফিক এলএলসি
৪০ ম্যানিং রোড, ম্যানিং পার্ক বিলেরিকা, এমএ ০১৮২১ মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র

অর্ডার তথ্য order.biosensors@bruker.com
প্রযুক্তিগত সহায়তা support.dbs@bruker.com সম্পর্কে

www.dynamic-biosensors.com
যন্ত্র এবং চিপগুলি জার্মানিতে তৈরি এবং তৈরি করা হয়। ©2025 ডায়নামিক বায়োসেন্সরস জিএমবিএইচ
শুধুমাত্র গবেষণা ব্যবহারের জন্য। ক্লিনিকাল ডায়াগনস্টিক পদ্ধতিতে ব্যবহারের জন্য নয়।

1. বাফার A: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 7.2
2. বাফার C: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 8.0
3. বাফার PE40: 10 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 40 mM NaCl, pH 7.4, 0.05 % টুইন, 50 µM EDTA, 50 µM EGTA
4. 20 kDa-এর বেশি আণবিক ওজন সহ প্রোটিনগুলির সংমিশ্রণের জন্য: 10 kDa-এর MWCO সহ কেন্দ্রাতিগ ফিল্টার ইউনিটগুলি দ্রুত ঘনত্বের প্রক্রিয়ার জন্য অর্ডার করা যেতে পারে (অর্ডার নং: CF-010-5)।
5. বাফার B: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 1 M NaCl, pH 7.2

www.dynamic-biosensors.com

দলিল/সম্পদ

ডায়নামিক বায়োসেনসর ওয়াই-স্ট্রাকচার অ্যামাইন কাপলিং কিট ১ [পিডিএফ] ব্যবহারকারী ম্যানুয়াল HK-NYS-NHS-1, Y-স্ট্রাকচার অ্যামাইন কাপলিং কিট 1, অ্যামাইন কাপলিং কিট 1, কাপলিং কিট 1, কিট 1

তথ্যসূত্র

• ব্যবহারকারীর ম্যানুয়াল